永劫无间中的女性角色各具特色，从刺客到辅助应有尽有。目前游戏里比较受欢迎的女性角色包括宁红夜、迦南、胡桃、崔三娘、顾清寒、沈妙、季莹莹、玉玲珑、魏轻和妖刀姬等。这些角色不仅外形设计精美，技能机制也各有千秋，适合不同风格的玩家选择。比如宁红夜是团控型角色，迦南擅长隐身刺杀，胡桃则是团队中的治疗担当。
宁红夜作为游戏中的标志性角色，定位是团控型战士。她的技能以沉默和击飞为主，大招赤练无明能对范围内敌人造成眩晕效果，在团战中非常实用。虽然她双眼被遮蔽，但战斗时丝毫不影响发挥，反而增添了几分神秘感。迦南则是高机动性刺客的代表，拥有瞬移和隐身技能，追魂和寂静暗刑让她在战场上神出鬼没，适合喜欢灵活操作的玩家。
胡桃是游戏中少有的治疗型角色，技能围绕团队辅助展开。她的净天地能设置治疗法阵，为队友提供持续恢复，而天赋奥义还能远程复活队友。崔三娘和顾清寒则更偏向输出和控制，崔三娘能召唤水龙卷控制敌人，顾清寒则利用寒冰之力制造护盾和减速效果。这些角色在三排模式中表现尤为亮眼，合理搭配能大幅提升团队容错率。
妖刀姬和玉玲珑属于后期加入的角色，但人气一直居高不下。妖刀姬以华丽的刀法连招著称，技能附带霸体效果，正面作战能力极强。玉玲珑则擅长中距离消耗，技能组合灵活多变。如果想尝试冷门但强力的角色，魏轻和沈妙也值得关注，她们的技能机制独特，在特定阵容中能发挥意想不到的效果。
